单道移液工作站在NGS建库流程中的标准化应用
在二代测序(NGS)技术高速发展的背景下,建库流程的标准化与自动化成为提升检测效率、降低批次差异的关键。Atom单道移液工作站凭借其专利蠕动喷射泵、高精度定位平台及智能化软件系统,在NGS建库的样本浓度均一化、文库定量与Pooling等核心环节展现出显著优势,为实验室提供了高效、精准的解决方案。

一、样本浓度均一化:消除起始偏差,保障扩增均一性
NGS建库对样本起始浓度要求极为严格。传统手工移液操作依赖实验人员经验,易因移液量偏差导致样本浓度不均,进而影响多重PCR扩增效率或杂交捕获富集效果。Atom单道移液工作站通过非接触式蠕动喷射泵技术,结合动态流量补偿算法,实现了10μL至1mL分装体积的精准控制。例如,在某三甲医院检验科的实际应用中,该系统对96份核酸样本进行浓度均一化处理,批间差CV值仅1.8%,显著优于手工操作的15%-20%波动范围。其核心优势在于:
1.非接触式分装:避免吸头与样本的物理接触,减少交叉污染风险;
动态流量补偿:通过实时监测泵管压缩频率,自动修正液体粘度、温度2.变化对分装体积的影响;
3.耗材自适应定位:系统可自动识别96孔板、1.5mL螺口管等耗材类型,并调整Z轴定位精度至0.1mm,确保分装位置精准。
二、文库定量标准化:高通量荧光检测,数据自动采集
NGS上机前需对文库浓度进行精准测定,传统Qubit荧光定量仪需手动加样,单次检测耗时约30分钟且易引入操作误差。Atom系统集成高通量荧光计模块,可批量完成96个样本的文库定量,全流程仅需15分钟。其技术亮点包括:
1.自动化荧光激发与检测:内置LED光源与光电二极管传感器,支持dsDNA、RNA等不同荧光染料的定量检测;
2.数据一键导出:检测结果自动生成Excel表格,包含样本编号、浓度值、CV值等关键参数,避免人工记录错误;
3.与分装功能联动:定量完成后,系统可根据预设阈值自动筛选合格文库,并启动Pooling流程,实现“定量-筛选-混合”全流程无缝衔接。
三、文库Pooling智能化:两种模式灵活适配,满足多样本需求
Pooling是将不同文库按比例混合的过程,其准确性直接影响测序数据的覆盖均一性。Atom系统支持两种Pooling模式:
1.浓度均一化Pooling:根据各文库浓度计算混合体积,确保每个文库在最终混合液中的摩尔数相等;
2.原始浓度Pooling:通过导入样本信息表,系统自动换算不同文库的混合体积,适用于已知浓度差异的样本。
在某药企的化合物筛选项目中,Atom系统连续72小时运行完成384个文库的Pooling,流量稳定性CV值<3%,且支持断点续跑功能,大幅提升了大规模测序项目的执行效率。
四、成本与效率双优化:本土化设计降低使用门槛
相较于进口多道移液工作站,Atom单道系统通过模块化设计实现了成本与性能的平衡:
1.采购成本降低40%:单道架构省去了多通道校准与维护费用;
2.耗材成本可控:泵管更换成本仅0.5元/次,年维护费用不足进口设备的30%;
3.操作培训周期短:新手通过2小时培训即可独立完成建库全流程,非专业人员操作准确率达98%。
结语
Atom单道移液工作站通过机械结构创新、液路控制算法优化及智能化软件设计,在NGS建库流程中实现了从样本处理到文库混合的全链条标准化。其核心技术不仅体现在10μL级分装精度,更通过模块化扩展、无线操控等特性,满足了从科研到临床的多样化需求。随着本土化技术的持续迭代,该系统有望成为NGS实验室提升检测通量、降低运营成本的首选工具。
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